文章目录

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养

    1.2.2 CCK-8实验

    1.2.3 药物剂量选择、细胞分组及细胞形态观察

    1.2.4 平板克隆实验

    1.2.5 流式细胞术检测细胞凋亡

    1.2.6 细胞划痕愈合实验

    1.2.7 Transwell实验

    1.2.8 Western blot检测蛋白表达

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 葛根素对A549细胞存活率、细胞形态及体外生长能力的影响

2.2 葛根素可诱导A549细胞凋亡

2.3 葛根素可抑制A549细胞侵袭和迁移能力

2.4 葛根素对A549细胞中与侵袭迁移和NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响

3 讨论

文章摘要:目的:探讨葛根素对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的作用及其机制。方法:不同浓度葛根素处理非小细胞肺癌A549细胞后,采用CCK-8法检测葛根素对非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制作用及半数抑制浓度（half-inhibitory concentration,IC50）;显微镜下观察葛根素对非小细胞肺癌A549细胞形态的影响;平板克隆实验检测葛根素对非小细胞肺癌A549细胞体外生长能力的影响; Annexin V/PI双染流式细胞术检测肺癌细胞凋亡率; Transwell实验和细胞划痕愈合实验检测葛根素对非小细胞肺癌A549细胞侵袭和迁移能力的影响; Western blot实验检测葛根素作用于非小细胞肺癌A549细胞后MMP-2、MMP-9、p-p65、p65蛋白表达的变化。结果:与对照组相比,葛根素呈剂量依赖性（0.8 mmol/L、1.6 mmol/L、3.2 mmol/L）抑制A549细胞的细胞活力（P <0.05）,葛根素作用于A549细胞48 h后的IC50为（1.917±0.119） mmol/L。葛根素能够明显改变A549细胞的形态,表现为细胞数目减少,细胞皱缩变圆,细胞贴壁能力减弱,细胞间距变大,细胞丝状伪足减少。与对照组相比,2 mmol/L和3 mmol/L的葛根素均能明显抑制A549细胞的集落形成能力（P <0.05）。与对照组相比,葛根素呈剂量依赖性（1 mmol/L、2 mmol/L、3 mmol/L）诱导A549细胞凋亡（P <0.05）。与对照组相比,2 mmol/L和3 mmol/L的葛根素均能明显抑制A549细胞侵袭能力（P <0.05）。与对照组相比,葛根素呈剂量依赖性（1 mmol/L、2 mmol/L、3 mmol/L）抑制A549细胞迁移能力（P <0.05）。与对照组相比,葛根素呈剂量依赖性（1 mmol/L、2 mmol/L、3 mmol/L）抑制A549细胞中MMP-2蛋白、MMP-9蛋白表达和降低p-p65/p65的比值（P <0.05）。结论:葛根素可能通过NF-κB信号通路抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移能力。

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