文章目录

1 材料与方法

1.1 细胞株、主要试剂和仪器

1.2 恶性转化BEAS-2B细胞模型的构建及鉴定

    ①克隆形成能力:采用平板克隆形成实验。

    ②迁移能力:采用划痕实验。

    ③增殖活性:采用MTT实验。

1.3 差异表达miRNA的筛选

1.4 差异表达mRNA的筛选

1.5 细胞中hsa-miR-2115-3p和hsa-miR-4521表达的检测

1.6 统计学处理

2 结果

2.1 恶性转化BEAS-2B细胞模型的鉴定

2.2 差异表达mRNA与miRNA的筛选

2.3 差异表达mRNA的GO和KEGG分析结果

2.4 两组细胞中hsa-miR-2115-3p 和hsa-miR-4521表达的比较

3 讨论

文章摘要:目的:探索与苯并（a）芘[B（a）P]诱导永生化人支气管上皮细胞（BEAS-2B细胞）恶性转化相关的miRNA和mRNA。方法:采用5 mg/L的B（a）P对BEAS-2B细胞进行染毒。取染毒和未染毒细胞,分别采用平板克隆形成实验、划痕实验、MTT法检测克隆形成能力、迁移能力和增殖活性;采用芯片技术检测miRNA和mRNA表达谱,以FC≥2.0且P<0.05为标准筛选出差异表达miRNA和mRNA,对其进行GO注释及KEGG通路分析。采用实时荧光定量PCR法检测两组细胞中hsa-miR-2115-3p和hsa-miR-4521的表达。结果:染毒组细胞克隆形成能力、迁移能力和增殖活性均明显增强（P<0.05）。芯片分析结果显示,染毒组和未染毒组细胞在不同的簇中;共筛选出127种差异表达miRNA（29种表达上调,98种表达下调）和159种差异表达mRNA（99种表达上调,60种表达下调）。GO注释及KEGG通路分析结果显示,差异表达mRNA可能参与了细胞活素-受体相互作用介导的信号通路、p53信号通路介导的细胞凋亡等。染毒组细胞中hsa-miR-2115-3p和hsa-miR-4521的表达低于未染毒组（P<0.05）,与芯片结果一致。结论:筛选出B（a）P诱导BEAS-2B恶性转化相关的miRNA和mRNA。

文章关键词:

论文DOI:10.13705/j.issn.1671-6825.2021.01.040

论文分类号:R114;R734.2