文章目录

1 材料与方法

1.1 材料

    1.1.1 主要药品及试剂

    1.1.2 肺癌细胞株及实验动物

1.2 方法

    1.2.1 A549细胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立

    1.2.2 裸鼠的分组与处理

    1.2.3 计算肿瘤的体积及体质量

    1.2.4 CCK-8实验检测细胞活性

    1.2.5 划痕实验检测细胞迁移能力

    1.2.6 Transwell小室检测细胞侵袭能力

    1.2.7 qRT-PCR检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-9

    1.2.8 蛋白印迹法(Western Blot, WB)检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-9蛋白的表达

    1.2.9 统计学方法

2 结 果

2.1 各组裸鼠肿瘤体积及体质量

2.2 各组肿瘤细胞的活性情况(CCK-8结果)

2.3 芪珍胶囊组和对照组肿瘤细胞迁移和侵袭能力

2.4 E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-9在各组裸鼠移植瘤组织中的表达(qRT-PCR和WB结果)

3 讨 论

文章摘要:目的使用肺癌细胞株A549建立裸鼠皮下移植瘤,应用芪珍胶囊进行干预,探讨上皮间充质转化（Epithelial-Mesenchymal Transition, EMT）在肿瘤中的作用机制。方法常规培养人肺癌细胞株A549注射于Balb/c裸鼠皮下制备动物模型。模型制备成功后裸鼠随机分为芪珍胶囊组和对照组,每组8只。芪珍胶囊组给予芪珍胶囊溶液（4.5 g/kg）经口灌胃给药,每日一次;对照组瘤内注射等量无菌氯化钠注射液。每3日估算一次肿瘤体积。两组均干预6周后处死裸鼠,取出皮下肿瘤,测量其重量。CCK-8法检测两组肿瘤细胞活性。划痕实验检测两组细胞的迁移能力。荧光实时定量PCR（qRT-PCR）及蛋白印迹（Western Blot, WB）检测两组肿瘤EMT标志物E-钙粘素（E-cadherin）、N-cadherin、波形蛋白（Vimentin）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的mRNA和蛋白水平。结果与对照组比较,芪珍胶囊组Balb/c裸鼠皮下移植瘤的体积和重量都低于对照组,从3周起体积差异有统计学意义（3周:t=-3.097,P<0.01;4周:t=-4.516,P<0.01;5周:t=-3.896,P<0.01;6周:t=-5.075,P<0.01）,重量差异有统计学意义（t=-4.147,P<0.01）。芪珍胶囊组肿瘤细胞活性在48 h和72 h明显低于对照组（t=-4.084,P<0.01;t=-7.540,P<0.01）,细胞迁移率明显低于对照组（t=-6.249,P<0.01）,穿膜细胞数明显少于对照组（t=-9.773,P<0.01）。qRT-PCR及WB结果均显示,芪珍胶囊组N-cadherin、Vimentin、MMP-9的mRNA和蛋白表达低于对照组,而E-cadherin表达高于对照组（P<0.01）。结论肺癌细胞裸鼠皮下移植瘤能够较好地模拟实体肿瘤的生长过程,EMT在其中发挥了重要作用,芪珍胶囊能够通过抑制肿瘤EMT延缓移植瘤的生长。

文章关键词:

论文作者:吴剑霞 檀碧波 张明明 吕彩霞 隋爱霞 刘文博 

论文分类号:R734.2;R-332